免疫沉淀 (Immunoprecipitation，IP) 是利用抗原抗體特異性反應(yīng)純化富集目的蛋白常用的一種實(shí)驗(yàn)方法?？贵w與目的蛋白結(jié)合后，再與ProteinA/G偶聯(lián)的Agarose或Sepharose珠子孵育，進(jìn)而分離得到珠子-ProteinA/G-抗體-目的蛋白復(fù)合物，隨后可通過WB實(shí)驗(yàn)檢測(cè)目的蛋白及與目的蛋白相互作用的其他蛋白或蛋白復(fù)合體。

然而在免疫沉淀和免疫共沉淀(co-IP) 實(shí)驗(yàn)中，常常因?yàn)橐豢沟南拗?，IP和WB的操作過程中不得不用到同種一抗或同種屬來源的一抗。這種情況下，如果使用常規(guī)的抗種屬IgG酶標(biāo)二抗，WB實(shí)驗(yàn)中將檢測(cè)到IP抗體變性后產(chǎn)生的重鏈（約55kDa）和輕鏈（約25kDa）。由于IP時(shí)使用的抗體量往往比WB檢測(cè)時(shí)抗體使用量大非常多，此時(shí)非特異的信號(hào)往往會(huì)部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信號(hào)，尤其是輕重鏈附近的條帶，極大地影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如何避免IP檢測(cè)過程中輕、重鏈的干擾，以下經(jīng)驗(yàn)可供大家參考：
方案一 WB檢測(cè)時(shí)選擇和IP時(shí)不同種屬的一抗，避免IP一抗的影響

通過使用不同種屬來源抗體，WB 檢測(cè)時(shí)可以有效避免重鏈輕鏈信號(hào)的影響。但如果市面上一抗沒有多種種屬來源可供選擇，將極大的限制實(shí)驗(yàn)開展；同時(shí)，同類抗體需要不同種屬來源大大增加項(xiàng)目支出成本。
方案二 Wb檢測(cè)時(shí)選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗
為了避免輕、重鏈的影響，WB檢測(cè)時(shí)可根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量選擇只和重鏈或輕鏈反應(yīng)的二抗。如果目標(biāo)蛋白分子量靠近25KD，為了避免抗體輕鏈的干擾，選擇重鏈特異性二抗；如果目標(biāo)蛋白分子量靠近55KD，為了避免抗體重鏈的干擾，選擇輕鏈特異性二抗。
雖然上述兩種方案可以規(guī)避輕、重鏈的影響，但是在實(shí)際操作過程中仍顯得復(fù)雜和繁瑣?，F(xiàn)提供一種簡(jiǎn)單有效的方案——IP專用納米二抗，讓輕、重鏈的影響不再成為IP實(shí)驗(yàn)的障礙。
Anti-Mouse/Rabbit lgG for IP AlpSdAbs® VHH(HRP)是基于單價(jià)重組納米抗體與HRP定點(diǎn)偶聯(lián)而成，可有效的檢測(cè)IP實(shí)驗(yàn)中鼠源或兔源的一抗，并且不用擔(dān)心IP抗體輕、重鏈的影響。
IP專用納米二抗選擇性地檢測(cè)lgG的非還原形式(構(gòu)象特異性)，與還原的變性形式無反應(yīng)。在IP實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)一種蛋白被IP抗體免疫沉淀后，仍然可以用同一種一抗或同種屬來源的一抗檢測(cè)目的蛋白，而不用擔(dān)心輕重鏈的干擾。用IP專用納米二抗來檢測(cè)一級(jí)抗體，只能識(shí)別天然構(gòu)象的一抗，不能識(shí)別變性后的IP抗體重鏈和輕鏈，有效的避免了輕重鏈的干擾，讓IP實(shí)驗(yàn)檢測(cè)更準(zhǔn)確。同時(shí)，IP專用納米二抗保留了納米抗體高親和力、高結(jié)合力、極端穩(wěn)定的特性，能高效快速穩(wěn)定的結(jié)合目的蛋白;IP專用納米二抗采用重組表達(dá)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，極大的降低了批間差異，讓實(shí)驗(yàn)更穩(wěn)定、更簡(jiǎn)單，讓您的IP實(shí)驗(yàn)更加放心舒心。


IP專用納米二抗產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格	價(jià)格
001-100-005	Anti-Mouse IgG for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100ug	1600
001-180-005	Anti-Mouse&Rabbit Light chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100ug	1500
001-190-005	Anti-Mouse&Rabbit Heavy chain for IP, AlpSdAbs® VHH(HRP)	100ug	1500