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在WesternBlotting實(shí)驗(yàn)中,我們應(yīng)該怎樣盡量減少有毒物質(zhì)對(duì)身體的傷害?

發(fā)布時(shí)間:2020-12-08 05:18:22 點(diǎn)擊:
生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中研究對(duì)象主要是細(xì)胞,DNA,RNA和蛋白質(zhì)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我們常常要對(duì)這些實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行觀察,提取,裂解等操作。然而,要知道我們?nèi)梭w本身就是由細(xì)胞組成的,細(xì)胞內(nèi)包括DNA,RNA,蛋白質(zhì)。所以對(duì)這些實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行操作時(shí),使用的很多試劑也會(huì)對(duì)我們身體產(chǎn)生危害。今天,小編就為大家介紹一下WB實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的幾種有毒物質(zhì)以及防護(hù)措施。
丙烯酰胺Acrylamide
聚丙烯酰胺是SDS-PAGE凝膠中的主要成分。未聚合的丙烯酰胺是一種潛在的神經(jīng)毒素,可通過(guò)皮膚吸收。丙烯酰胺的危害主要是引起神經(jīng)毒性,同時(shí)還有生殖、發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變化,試驗(yàn)還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物,職業(yè)接觸人群的流行病學(xué)觀察表明,長(zhǎng)期低劑量接觸丙烯酰胺會(huì)出現(xiàn)嗜睡、情緒和記憶改變、幻覺(jué)和震顫等癥狀,伴隨末梢神經(jīng)病如手套樣感覺(jué)、出汗和肌肉無(wú)力。具有累積毒性,不容易排毒。因此在稱量丙烯酰胺和亞甲基雙酰胺粉末時(shí),戴好手套和面罩,在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。聚合的丙烯酰胺是無(wú)毒的,但是使用時(shí)也應(yīng)小心,因?yàn)槠渲锌赡芎坝猩倭课淳酆系谋0贰?br />N,N’-亞甲雙丙烯酰胺
有毒,影響中樞神經(jīng)系統(tǒng),切勿吸入。
過(guò)硫酸銨APS)
對(duì)黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性,吸入可致命。操作時(shí)戴合適的手套、安全眼鏡和防護(hù)服。始終在通風(fēng)櫥里操作,操作完后徹底洗手。
TEMED
TEMED是四甲基乙二胺(Tetramethylethylenediamine)的縮寫(xiě)。TEMED常用于SDS-PAGE中凝膠的制備。與過(guò)硫酸銨連用催化丙烯酰胺的聚合,制取在凝膠電泳用于分離蛋白質(zhì)或核酸的聚丙烯酰胺凝膠。TEMED易燃,有腐蝕性,具有強(qiáng)神經(jīng)毒性。另外,TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)蓋緊瓶蓋。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,戴口罩操作。
b-巰基乙醇 
b-巰基乙醇是一種強(qiáng)還原劑,它被廣泛使用的原因是它的羥基使它能夠溶解于水中,并且降低它的揮發(fā)性。常用于蛋白質(zhì)電泳的loading buffer內(nèi),主要作用是破壞二硫鍵。β-巰基乙醇有難聞氣味。高濃度溶液對(duì)黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有極大損害。操作時(shí)需要戴好手套和護(hù)目鏡并在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。
二硫蘇糖醇DTT
二硫蘇糖醇(DTT),同巰基乙醇一樣是很強(qiáng)的還原劑,散發(fā)難聞的氣味??捎米鞯鞍踪|(zhì)的保護(hù)劑,用于防止蛋白質(zhì)內(nèi)的半胱氨酸被氧化。也可用于SDS-PAGE電泳時(shí)樣品的添加劑,用于徹底打破蛋白質(zhì)中的二硫鍵??梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而危害健康。當(dāng)使用固體或高濃度儲(chǔ)存液時(shí),戴手套和護(hù)目鏡,在通風(fēng)櫥中操作。
苯甲基磺酰氟PMSF
這里必須要給一個(gè)大大的危險(xiǎn)符號(hào),PMSF劇毒,請(qǐng)一定小心使用?。?!
苯甲基磺酰氟(PMSF),常用于蛋白質(zhì)的提取過(guò)程中,是胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶的抑制劑,可抑制絲氨酸蛋白酶例如胰蛋白酶(trypsin)和胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin),也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶,是一種高強(qiáng)度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對(duì)呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性??梢蛭?、咽下或皮膚吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡,始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里使用。在接觸到的情況下,要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚,已污染的工作服丟棄掉。
甲醇
甲醇常常用于分析試劑或者清除去油劑,有很大的毒性并易揮發(fā)。甲醇的毒性對(duì)人體的神經(jīng)系統(tǒng)和血液系統(tǒng)影響最大,它經(jīng)消化道、呼吸道或皮膚攝入都會(huì)產(chǎn)生毒性反應(yīng),甲醇蒸氣能損害人的呼吸道粘膜和視力。急性中毒癥狀有:頭疼、惡心、胃痛、疲倦、視力模糊以至失明,繼而呼吸困難,最終導(dǎo)致呼吸中樞麻痹而死亡。慢性中毒反應(yīng)為:眩暈、昏睡、頭痛、耳鳴、視力減退、消化障礙。使用時(shí)要避免吸入其揮發(fā)的汽霧。要戴合適的手套和安全眼鏡。
紫外光
紫外光是實(shí)驗(yàn)室中常見(jiàn)的光源。能夠用在無(wú)菌室進(jìn)行滅菌,也會(huì)用來(lái)觀察凝膠中的DNA。紫外光可損傷眼視網(wǎng)膜。切勿用裸眼和沒(méi)有防護(hù)裝置的紫外光源。在實(shí)驗(yàn)室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀。只能通過(guò)吸收有害波長(zhǎng)的濾片或安全玻璃片才能觀察。紫外線也是誘變劑和致癌的。為使暴露減少到最低限度,確保紫外光源要采用適當(dāng)防護(hù)裝置。在紫外光下操作時(shí)要戴合適的預(yù)防性手套。
疊氮鈉(NaN3) 
在生化研究中,疊氮化鈉屬于誘變劑,與其化學(xué)性質(zhì)有關(guān)的解釋是因?yàn)榀B氮酸根離子可以與某些酶作用,主要是因?yàn)樗幸欢ǖ呐湮恍?,可以替代某些正常的配體,而使某些生物蛋白質(zhì)發(fā)生突變。 毒性非常大。它阻斷細(xì)胞色素電子運(yùn)送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標(biāo)記清楚??梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而損害健康。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡,操作時(shí)要格外小心。
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